在生命科學研究和臨牀診斷中,核酸的精準、快速檢測至關重要。自問世以來,實時熒光定量PCR(Quantitative Real-Time PCR, qPCR)憑藉其卓越的靈敏度與定量能力,始終佔據着核心地位。其經典技術路線,如TaqMan水解探針法,依賴於一條與靶序列完全互補、且雙端標記有熒光基團和淬滅基團的寡核苷酸探針。然而,這種“一靶一探針”的模式在面對多靶標檢測需求時,面臨着